1 固定

2 水洗

3 切り出し

4 番号付け

5 脱水

6 脱アルコール

7 パラフィン浸透

8 パラフィン包埋

9 台木につける

10 薄切

11 脱パラフィン & 浸水

12 染色

13 脱水・透徹・封入

12 染色

Gomori’s one step trichrome method

膠原線維を緑色に核を黒紫に染色する。

染色手順

1脱パラフィンキシレン3槽、各10分
2脱キシレン100%エタノール3槽、各5分
3浸水95%, 70%エタノール各5分
4流水洗水道水
5水洗蒸留水
6染色 (注記)1 Weigertの鉄ヘマトキシリン10分
7色出し水道水15分
8染色trichrome染色液20分
9分別0.2%酢酸水2分
10脱水 (注記)2 95%エタノール5分
11脱水 (注記)3 100%エタノール3槽、各5分
12透徹キシレン3槽、各10分
13封入

作業ポイント

(注記)1 染色

作業

ヘマトキシリン

  • Weigertの鉄ヘマトキシリンの代わりにMeyer のヘマトキシリンでもよい。この場合は過染気味に染色する。染色時間を10分間にする

(注記)2 脱水

作業

95%エタノール

  • 色落ちするので専用を使う

(注記)3 脱水

作業

100%エタノール

  • 1槽は色落ちするので専用を使う

染色液

Weigertの鉄ヘマトキシリン

使用時に第1液と第2液を等量混合する。

第1液
ヘマトキシリン1g
100%エタノール100ml

(注記)温めると溶け易い。

第2液
40%塩化第2鉄3ml
蒸留水96ml
濃塩酸1ml

(注記)第1、2液ともに長期保存できるが、混合した後は長期保存できない。

Trichrome染色液

Chromotrope 2R0.6g
Fast green FCF0.3g
リンタングステン酸0.6g
酢酸1ml
蒸留水100ml

(注記) 膠原線維を青くしたい場合はFast greenの代わりにアニリン青を使う
(注記) 長期保存可。

染色結果

黒紫
膠原線維
筋、細胞質、赤血球、線維素
肺の動脈

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